蜂蜜检测方法的研究进展

来自 实验室仪器网

随着分析仪器的不断进步，蜂蜜检测也日新月异，目前常用的检测方法有AAS法和ICP-AES法、可见分光光度法、气相色谱发及气相色谱-质谱法、HPLC法、近红外光谱法以及中红外光谱法等，本文将着重对其进展进行阐述。

AAS法和ICP-AES法检测蜂蜜

AAS法和ICP-AES法对蜂蜜矿物质含量的测定发挥的重要作用，蜂蜜中矿物质主要有镁、磷、锰、铁、钙、铜、钠、钾、铝、硼、铬、铅等。这些矿物质主要来自于花蜜，与蜜源植物生长的土壤和周围的大气有很大的关系，矿物质在人体新陈代谢的生命活动中是不可缺乏的物质，但其含量太多会引起中毒，太少了，因人体缺乏这些微量元素会引起各起各样的疾病,目前矿物质含量的研究已被成功地用于鉴别加利西亚蜂蜜。

可见分光光度法检测蜂蜜

可见分光光度法在蜂蜜中还原糖的分析中占据相当重要的地位。它具有操作简便、快速、成本低、便于大量测定、耗时短、不造成污染等特点，已逐渐取代了操作复杂、灵敏度低的国标滴定法检测还原糖，其原理在蜂蜜溶液中加入显色剂，如间苯二酚、铁氰化钾，蒽酮硫酸溶液等，利用还原糖的还原末端与氧化剂发生反应产生高灵敏性发色基团或消耗带有发色基团的氧化剂而达到检测目的。已报道的方法有:经典的Somogyi-Nelson法、DNS法、铁氰化物法和BCA法。目前，除Somogyi-Nelson法之外，其他方法都得到了不同程度的改进，而MBTH法、甲胺法则是近几年新涌现的方法。

气相色谱发及气相色谱-质谱法检测蜂蜜

气相色谱发及气相色谱-质谱法在蜂蜜品种鉴定中应用非常广泛，它主要是被用于蜂蜜中挥发性成分的分离、鉴别。并对蜂蜜中的芳香性成分进行分析研究，发现不同品种蜂蜜的气相色谱图有不同的特征峰，因此，利用气相色谱图确定蜂蜜的蜜源种类似乎可行，迄今为止，约有600种挥发性化合物在多种蜂蜜类型中被鉴定出；AlissandrakisE等研究发现，与单花蜜特殊气味有关的挥发性物质一般来源于其对应的植物花粉，通过溶剂萃取，动态顶空萃取(DHS)，固相微萃取等萃取方法研究单花蜜中的挥发性物质成分，将挥发性物质成分作为分类单花蜂蜜的特征标记，是目前研究的热门课题之一；BianchiF等用动态顶空萃取法和GC-MS法测定分离出草莓蜜中28个芳香化合物，其中α-异佛尔酮，β-异佛尔酮和酮代异佛尔酮被认为是草莓蜜的特征标记，动态顶空萃取法是花粉分析的有效方法，尤其用于分析如草莓蜜这种花粉含量少的蜂蜜样品，尽管，通过分析蜂蜜挥发性化合物得到的大量信息有助于识别蜂蜜品种，但是难以区分多花蜜和单花蜜，另外，在蜂蜜处理和贮存过程中，挥发物会有所变化。

HPLC法检测蜂蜜

HPLC是20世纪60年代开始的一种现代分析技术，是在液相色谱的技术基础上发展起来的，具有高效、高灵敏度、快速、重现性好、应用范围广等特点，适合于蜂蜜中酚酸和多酚含量测定，其中某些物质也已经作为鉴别蜂蜜品种的可能标记。研究发现不同单花种蜂蜜中的酚类化合物种类和含量存在很大差别，颜色深的蜂蜜含有较多的酚酸衍生物，浅色蜂蜜中的则黄酮量较少。Tomás-BarberánFA等研究证实，用高效液相色谱法测定蜂蜜中的黄酮类化合物，如生松素醇、柯因、高良姜素、芹菜素、槲皮素和莰菲醇等，可作为单花蜂蜜的特征性标记。在欧洲和澳大利亚桉树蜜中检出的杨梅酮，槲皮素黄酮等物质，由于在欧洲其他单一花蜜中未被检出，而被认定为澳大利亚桉树蜜中的特征物质，分析结果表明用高效液相色谱法分析澳大利亚桉树蜂蜜的蜜源植物的化学成分以鉴定其植物来源，这些化合物的含量如果不明显，其表征状态非常可疑，因此，由于蜂蜜中许多酚类化合物来自于花蜜，可通过它来鉴定蜂蜜品种。

近红外光谱法检测蜂蜜

在过去几十年里，近红外光谱法(NIR)已经成为一个定性和定量分析食品的快速、稳定的技术，以透射或反射模式鉴定蜂蜜的植物和地域来源，但一般需结合统计方法分析样品数据。Davies等对NIR用于鉴别蜂蜜蜜源植物和地理来源的可能性进行评价，在1100～2498nm处，以透射的方式测定不同温度下不同来源的洋槐蜜、板栗蜜、石南蜜、油菜蜜样品，对其近红外光谱图进行一阶和二阶倒数处理，运用主成分分析和典型变量分析来鉴定蜂蜜的种类。结果表明，洋槐蜜和油菜蜜聚合度比其他两种蜂蜜好。同时提出应加大样品量及来源进行进一步研究。CorbellaE等报道了可见/近红外光谱(VIS/NIR)用于分类蜂蜜蜜源植物来源，分别用主成分分析(PCA)，判别偏最小二乘法(DPLS)回归和线性识别分析(LDA)建立校正模型，结果显示用LDA和DPLS分类较准确，正确识别牧草蜜75%以上，桉树蜜85%以上，尽管样品量有限，但可见/近红外光谱也许可被用来分类蜂蜜植物源的可替代方法。

中红外光谱法检测蜂蜜

中红外光谱(MIR)提供了更特征和明显的吸收谱带，所以比NIR更能提供样品信息。RuoffK等[32]用傅立叶变换光谱仪(FT-IR)测定144份不同植物来源的蜂蜜样品的20个不同参数，如水分、葡萄糖、果糖、蔗糖、果糖/葡萄糖、葡萄糖/水、电导率、pH值、自由酸度、羟甲基糠醛(HMF)、脯氨酸、异麦芽糖、海藻糖和曲二糖等，对蜂蜜进行定性分析，同时结合花粉分析作为评价蜂蜜植物来源的筛选工具，中红外光谱常结合附件实现对蜂蜜品种的鉴定。TewariJC等用傅立叶变换光谱仪结合衰减全反射单次反射附件(ATR-MIR)检测蜂蜜植物来源，用主成分分析、人工神经网络分析处理光谱数据，苜蓿蜜、荞麦蜜、椴树蜜、柑桔蜜、胡萝卜蜜、紫花苜蓿蜜的识别率近100%。根据以建立的模型预测蜂蜜的植物来源。

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