玩具中邻苯二甲酸盐的含量用HPLC法如何检测
来自 实验室仪器网
HPLC法测定儿童玩具中邻苯二甲酸盐方法简便、快速、准确、灵敏度高、适应性好、回收率高，可用于工厂质量控制和检验机构样品检验。
仪器和试剂
BBP、DBP、DEHP、DNOP、DINP和DIDP购自美国Accustan-dard公司，纯度分别为：99·0%、99·3%、99·6%、99·6%、98·2%、99·5%；乙腈、甲醇、正己烷、二氯甲烷、甲苯、、氯仿等均为色谱纯(美国天地)。
分析条件
色谱柱：UltimateAQ-C18色谱柱(250mm×4·6mm，5μm，上海月旭公司)；流动相：乙腈/甲醇/水(V/V=90/10/0·5)；流速：0·8mL/min；柱温：25℃；检测波长：224nm；进样量：10μL。
标准溶液的配置
用甲醇分别将6种标准品配置成1mg/mLBBP、DBP、DEHP、DNOP、DINP和DIDP的储备液，使用时用甲醇稀释到所需要的浓度，图谱如图1。
样品处理
取5~10g样品，破碎至5mm×5mm，混匀，精密称取2·0000g，置于用滤纸叠成的萃取筒中，加入约100mL，于45℃的水浴中，索氏萃取8h，将萃取液转移到蒸发皿中，水浴挥干，残渣用甲醇定容于25mL容量瓶中，摇匀，用0·45μm的有机滤膜过滤，存于玻璃样品瓶中，待测。
色谱条件优化选择
考察了不同色谱柱(C8柱和ODS柱)和不同粒径的填料对PAEs分离的影响，发现C8柱对PAEs的保留较弱，且DEHP和DNOP不能有效分离；而C18柱能在25min内达到基线分离，5μm和3μm不同粒径的填料对分离没有什么影响，而且3μm粒径的填料柱压较高，价格也较贵，所以采用5μm粒径的填料。采用乙腈和甲醇，甲醇和水，乙腈和水作为流动相时，用90%乙腈甲醇溶液，DBP和DINP不能很好的分离；用乙腈/甲醇/水(V/V=90/10/0·5)溶液才能很好的分离开来，故选择乙腈/甲醇/水(V/V=90/10/0·5)作为流动相。若用乙腈比例递增的梯度洗脱，BBP和DBP出峰会延后，DINP和DIDP的出峰时间过长且拖尾，另外基线漂移不利于低浓度检测，因此本文采用等度洗脱，在相应的标准中[3-5]，都是计算这两种物质的色谱峰总面积之和，是由于DINP和DIDP都是由其相应的同分异构体组成的混合物，且欧盟对其也是按一种物质进行控制的，而该色谱条件下DINP和DIDP的检测限远远低于欧盟的管控限。对PAEs的混标进行紫外扫描，在224nm处有最大吸收，也参考了相关文献[13-15]，故选择224nm为检测波长。
前处理条件优化选择
- 提取方法考察：参考相关文献，常规的样品提取方法有：超声提取、加热回流提取、微波提取、索氏提取，在考察这三种提取方法时，索氏提取的提取率最高；
- 提取溶剂考察：参考相关文献，考察了：正己烷[4]、氯仿[5]、二氯甲烷[7]、[8]、乙酸乙酯[9]、甲醇[10]、乙醇的提取效率，最后得出和氯仿的提取效率相当，但提取的样品杂质更少，故选择作为方法的提取溶剂；
- 提取时间考察：在用进行索氏萃取时，考察了分别萃取时间为：2h、4h、6h、8h、10h，在萃取时间为8h和10h的时候萃取率相当，故选择8h为提取时间；
- 定容体积考察：考察了定容体积为：10mL、25mL、50mL，用10mL时含量偏低，用25mL和50mL定容时，含量相当，故选择25mL为定容体积；
- 定容溶剂考察：考察了定容溶剂为：正己烷、甲苯+正己烷、甲醇，甲醇定容时含量最高，并且标准品也是用甲醇配置的，故选择甲醇作为定容溶剂。
峰位确定
将各标准品配制成单标，按本方法确定的色谱条件，取各单标和混标10μL进样测定，按各保留时间确定出峰顺序，出峰顺序为：BBP(邻苯二甲酸丁苄酯)、DBP(邻苯二甲酸二丁酯)、DEHP[邻苯二甲酸二(2一乙基己基)酯]、DNOP(邻苯二甲酸二正辛酯)、DINP(邻苯二甲酸二异壬酯)、DIDP(邻苯二甲酸二异癸酯)。
阴性和系统适用性试验
不加入样品，加入试剂，按样品处理方法进行测定，在各组分相应保留时间处均没有吸收。取PAEs混标10μL进样测定，因DINP和DIDP是相应的同分异构体的混合物，管控指令中并未对其分开控制，只是对其总量进行了限制，故这两个物质的色谱峰不用完全分开；而BBP、DBP、DEHP、DNOP相互之间的分离度均>1·5，符合相关规定。理论板数按BBP峰计，不得小于5000。
精密度试验
取PAEs混标10μL进样6针，进行测定，考察各组分峰面积的相对标准偏差，结果见表1。
线性关系和检测限
在本方法确定的实验条件下，BBP、DBP、DEHP、DNOP和DINP在进样量1ng~1000ng，DIDP在40ng~4000ng之间，线性关系良好。各化合物的相关系数见表1。在S/N=3的条件下，确定各组分的检测限也列入表2中。
回收率试验
采用在实际样品中加入不同添加水平的混标的方式进行回收率实验，按1·4中的方法处理后分析，采用外标法定量，每个添加水平单独测3次，测定其回收率。
"玩具中邻苯二甲酸盐的含量用HPLC法如何检测"相关
购买、咨询（仪器设备提交仪器设备信息